抗体的概念和分类
作者:陈青(北京维德维康生物技术有限公司)
所有免疫学测定的方法中,均要求有抗体参与,没有抗体参与的生物学测定方法就不能叫免疫测定法。在elisa中,抗体的优劣直接影响测定的质量(如特异性、灵敏度、精密度和准确性等)和操作简便性。因此,了解抗体的基本特性,制备抗体是建立和发展elisa理想方法的基本条件。
1.抗体概念:
抗体:动物机体某些活性细胞在某些物质(抗原)刺激下产生的,并能与这些物质特异性结合的一类活性物质。
由于哺乳动物体内产生的抗体主要分布于体液,尤其是血清中,因此人们常常将抗血清作为抗体的同义词,将抗原抗体反应称为血清学反应。实际上抗血清表示从免疫动物体液或免疫细胞培养液中分离得到的原血清或培养液上清液,抗体则表示抗血清中能与抗原特异性结合的物质。
抗体的种类繁多,分类也无一定标准。在免疫学专著中,常根据其产生机制、抗原来源、抗原刺激的方式以及与抗原反应的性质等特征进行如下分类:
在elisa中,为了制备抗体,必须进行人工免疫,并要求用作免疫的抗原(免疫原)来源与免疫动物在分类学上不属于同一种,这样制备的抗体称为异种抗体。但在自然界中常常发现同种动物不同的个体之间,其组织成分的结构也有差异,用这些组织成分刺激同种属的另一个体,也能产生抗体,即同种抗体。某些抗体除与相应抗原发生结合反应外,还可与无血缘关系的抗原反应。如以豚鼠组织免疫家兔,制得的抗体在补体参与下能溶解绵羊红细胞,这一类抗体称为异嗜抗体。此外还有一类抗体称为自身抗体,是由于机体在某种条件下对自身组织(抗原物质)产生的抗体。这类抗体在elisa中不仅不可能应用,而且有干扰作用。根据抗原刺激的方式认为,凡经人工免疫、预防接种、感染或自然接触某些抗原物质所产生的抗体,都称为免疫抗体。反之,没有明显的抗原刺激即天然存在于体液中的抗体称为天然抗体。如血型系统中的抗A抗体和抗B抗体等,天然抗体不能用于elisa,相反对elisa测定的质量有影响。
所谓*抗体就是通常所指的由抗原刺激机体产生的抗体,其免疫球蛋白的单体有两个以上的抗原结合点,因此又称二价抗体或多价抗体。这类抗体与抗原结合后可在特定条件下出现可见反应。如在普通生理盐水中*抗体可与可溶性抗原(如蛋白质胶体)或颗粒性抗原(如微生物颗粒)反应,出现可见的沉淀或凝集现象。
不*抗体又称为单价抗体或封闭抗体,由于免疫球蛋白单体中两个抗原结合位点之一失去免疫活性,即只有一个位点可与抗原结合。这类抗体与抗原结合后,在生理盐水中不能形成大的抗原抗体复合物,故不出现可见反应,但能封闭和遮掩抗原决定簇,阻遏抗原再与相应的抗体结合。
抗原刺激动物机体后,由多个免疫细胞系(克隆)产生的抗体,可与同一抗原的多个决定簇结合,这类抗体称为多克隆抗体。通常由免疫动物制备的抗血清属于这一类。在特定条件下,通过克隆选择(即除掉多余的免疫细胞系),由一个细胞系产生只能识别抗原某一类决定簇的抗体,称为单克隆抗体。
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