孔雀石绿检测试剂盒使用指南

　　孔雀石绿检测试剂盒本试剂盒原理是竞争酶联免疫检测方法，利用萃取剂从样品中提取到孔雀石绿. 在固相载体微孔板中加入标准和处理的样品，然后加入孔雀石绿抗体，反应30分钟后洗板，然后加入HRP标记的孔雀石绿孵育30分后洗板，洗涤后加入显色剂，结合的酶将无色的显色剂转化为蓝色的产物;加入反应终止液后使颜色由蓝色变为黄色;在450nm波长进行检测，样品中的孔雀石绿浓度与吸收光强度成反比 。
 

　　孔雀石绿检测试剂盒操作步骤：
 

　　1. 使用前将试剂盒和样品处理物提前从冰箱中拿出来使其达到室温。装有洗液的洗瓶。
 

　　2.从铝箔袋中拿出要求数量的微孔条，放入干燥剂并重新封好袋子以免微孔条受潮。
 

　　3. 用移液器吸取75 μl 样品处理物到对应的测试孔 ，同时在每个孔中都加入75 μl 抗体溶液。
 

　　4. 轻轻震动30秒使其混匀孵育30分。
 

　　5. 孵育完成后，将微孔中的溶液倒入水槽中，用配好的洗板缓冲液清洗微孔。每孔每次至少加入250ul，微震荡洗涤后倒掉，重复三次，总共四次洗板。拍板，去掉残留的洗液。
 

　　6. 每个孔加入150 μL 酶标结合物。
 

　　7. 轻轻震动30秒使其混匀孵育30分。
 

　　8. 孵育完成后，将微孔中的溶液倒入水槽中，用配好的洗板缓冲液清洗微孔。每孔每次至少加入250ul，微震荡洗涤后倒掉，重复三次，总共四次洗板。拍板，去掉残留的洗液。
 

　　9. 每个孔加入150 μL 底物.孵育30分。
 

　　10. 每孔加入 100 μL 终止液。
 

　　11. 450nm 下读取每个孔的吸光度值(OD)。