ELISA试剂盒试验之前要做哪些准备工作？

ELISA试剂盒又叫酶联免疫试剂盒，自从60-70年代问世以来，得到*科研工作者的认可及推崇，在欧美及中国获得很大的推广，尤其是国内生化领域的长足发展。Elisa生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。

 

在使用ELISA试剂盒进行试验之前要做哪些准备工作呢？

 

1. 仔细阅读说明书，确定试剂盒在有效期内。

2. 按说明书确定所有试剂是否齐全，完整的Sunny ELISA试剂盒包含预包被酶标板，检测抗体、链霉亲合素标记的HRP、标准品、标准品稀释液、TMB显色液、终止液、洗液等10个组分。另外要确认试剂盒以外的材料是否齐全，如酶标仪、移液器及枪头、加样槽、离心管、量筒、蒸馏水、稀释用聚丙烯试管等。

3. 实验前，将试剂盒从冰箱中取出，室温放置半个小时，以让试剂恢复到室温。

4. 将10×的检测缓冲液（Assay Buffer）稀释到1×，吸取10X浓缩Assay buffer 5mL至50mL离心管，加蒸馏水至 50Ml，震荡混匀备用。1×Assay buffer主要用于检测抗体、HRP等浓缩液的稀释。

5. 将20×的洗涤液稀释到1×，吸取20X洗液50mL至1L量筒，加蒸馏水至1000Ml，混匀，转移至干净容器内备用，洗涤液用于实验中的洗涤步骤。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象，可用37℃水浴微加热使结晶*溶解后再配制洗涤液，（加热温度不要超过50℃）使用时洗涤液应为室温。